ABI7500 Fast Dx 擴(kuò)增儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程核心注意事項(xiàng)：保障安全高效運(yùn)行的關(guān)鍵要點(diǎn)
在精準(zhǔn)醫(yī)療和分子診斷領(lǐng)域，結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性是生命線。作為熒光定量PCR技術(shù)的核心設(shè)備之一，ABI7500 Fast Dx 實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)，其性能的穩(wěn)定發(fā)揮高度依賴于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮饕?guī)程。理解并嚴(yán)格遵守其標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)中的注意事項(xiàng)，不僅是實(shí)驗(yàn)成功的基石，更是保障實(shí)驗(yàn)室生物安全、數(shù)據(jù)可信以及儀器長久耐用的關(guān)鍵。忽視任何細(xì)節(jié)，都可能讓珍貴的樣本和寶貴的時(shí)間付之東流。
?? 一、 全面周到的實(shí)驗(yàn)前環(huán)境與準(zhǔn)備
- 環(huán)境要求是基礎(chǔ)： 確保儀器放置在符合要求的環(huán)境中至關(guān)重要。關(guān)注穩(wěn)定的電源供應(yīng)（建議使用UPS不間斷電源??），適宜的環(huán)境溫度（通常10°C至30°C）和濕度（避免過高濕度和冷凝），以及平穩(wěn)、無強(qiáng)震動(dòng)干擾的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。避免陽光直射和強(qiáng)氣流（如空調(diào)出風(fēng)口正對(duì)）。
- 試劑耗材預(yù)檢不可省： 嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)方案準(zhǔn)備試劑，充分混勻并短暫離心，避免氣泡。仔細(xì)檢查PCR板/八聯(lián)管、光學(xué)膜/蓋是否完好、清潔、無劃痕。確認(rèn)所有耗材與ABI7500 Fast Dx系統(tǒng)兼容。
- 儀器自檢是第一步： 開機(jī)后務(wù)必耐心等待儀器完成完整的自檢程序。留意軟件界面的自檢狀態(tài)提示，任何自檢錯(cuò)誤都必須查明原因并解決后方可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。定期（如每次開機(jī)或按計(jì)劃）運(yùn)行光學(xué)校準(zhǔn)（Optical Calibration）和背景校準(zhǔn)（Background Calibration）是保證熒光信號(hào)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵前置步驟??。
?? 二、 樣品處理與上樣：杜絕污染的核心防線
- 樣本管理嚴(yán)格分區(qū)： 堅(jiān)定執(zhí)行PCR實(shí)驗(yàn)室的嚴(yán)格分區(qū)原則（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增/產(chǎn)物分析區(qū)）。ABI7500應(yīng)放置在獨(dú)立的擴(kuò)增及分析區(qū)。嚴(yán)禁將擴(kuò)增產(chǎn)物或可能污染的物品帶入前區(qū)。
- 樣本滅活與防泄漏： 處理具有潛在生物危害性的樣本時(shí)，嚴(yán)格遵守生物安全規(guī)范。確保樣本在核酸提取后已適當(dāng)滅活（如適用）。在上樣至PCR板/管時(shí)，操作需格外小心，避免產(chǎn)生氣溶膠或發(fā)生液體濺灑、泄漏。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，立即對(duì)可能污染的區(qū)域和物品執(zhí)行去污染程序（如使用含氯消毒劑或?qū)Ｓ煤怂崆宄齽?/em>。
- 密封務(wù)必可靠： 使用與耗材匹配的光學(xué)膜或管蓋密封反應(yīng)體系，確保密封牢固、無縫隙。這是防止運(yùn)行過程中液體蒸發(fā)/污染、以及避免氣溶膠污染儀器內(nèi)部光學(xué)元件的核心要求。ABI7500的熱蓋溫度通常設(shè)置為95°C或更高，必須保證密封材料能耐受此高溫。
- 放置位置精準(zhǔn)： 將密封好的PCR板/八聯(lián)管正確、平穩(wěn)地放入儀器的樣品塊（Sample Block）中，確保放置到位。軟件中設(shè)定的樣品位置信息必須與實(shí)際物理位置完全一致。
?? 三、 軟件操作與程序運(yùn)行：參數(shù)準(zhǔn)確是關(guān)鍵
- 程序設(shè)置須校對(duì)： 在軟件中編輯或調(diào)用擴(kuò)增程序（Protocol）時(shí)，必須仔細(xì)、反復(fù)核對(duì)所有關(guān)鍵參數(shù)：包括反應(yīng)體積、Stage（步驟）與Step（子步驟）的溫度、時(shí)間設(shè)置、采集熒光的步驟（通常為退火/延伸階段）、目標(biāo)基因（Target）與報(bào)告熒光染料（Reporter/Dye）的選擇（如FAM, VIC等）、以及基線（Baseline）和閾值（Threshold）設(shè)置方法（手動(dòng)或自動(dòng)）。一處輸入錯(cuò)誤就可能導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗或結(jié)果誤判。
- 板文件（Plate Document）信息完整： 在運(yùn)行前，務(wù)必在軟件中完整設(shè)置板文件（Plate Document）信息，準(zhǔn)確指定每個(gè)孔位對(duì)應(yīng)的樣品名稱（Sample Name）、任務(wù)類型（Task – Unknown, Standard, NTC, NTC等）、檢測的目標(biāo)基因（Detector）以及重復(fù)次數(shù)。這是后續(xù)結(jié)果自動(dòng)分析和報(bào)告生成的基礎(chǔ)。清晰、規(guī)范的命名規(guī)則能大幅提高效率并減少混淆。
- 運(yùn)行中密切監(jiān)控： 啟動(dòng)運(yùn)行后，不意味著可以離開。通過軟件實(shí)時(shí)監(jiān)控儀器運(yùn)行狀態(tài)、溫度曲線、以及初期產(chǎn)生的擴(kuò)增曲線是否正常。留意系統(tǒng)是否有任何報(bào)錯(cuò)信息（如溫度異常、風(fēng)扇故障、激光錯(cuò)誤等）。運(yùn)行期間避免頻繁或劇烈開關(guān)儀器艙門（如果適用型號(hào)需要開門操作）或觸碰儀器。
- 文件保存及時(shí)： 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，立即保存原始數(shù)據(jù)文件和結(jié)果文件（通常為
.sds或.eds格式），按照實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)管理規(guī)范進(jìn)行命名和存檔。對(duì)關(guān)鍵結(jié)果進(jìn)行及時(shí)分析或?qū)С鰝浞荨?/li>
?? 四、 運(yùn)行后清潔、維護(hù)與校準(zhǔn)：儀器長壽命的保障
- 清潔去污是常規(guī)： 每次運(yùn)行結(jié)束并取出反應(yīng)板/管后，務(wù)必立即清潔樣品塊表面。使用無絨布蘸取70-80%乙醇（或其他儀器手冊(cè)推薦的溫和清潔劑）輕輕擦拭，去除可能的冷凝水、灰塵或殘留物，保持樣品塊清潔干燥。嚴(yán)禁使用強(qiáng)腐蝕性或磨蝕性清潔劑。定期檢查并清潔儀器外觀及通風(fēng)口。
- 定期維護(hù)要執(zhí)行： 嚴(yán)格遵守制造商建議的預(yù)防性維護(hù)計(jì)劃。這通常包括定期更換關(guān)鍵耗材（如HEPA過濾器，用于保障儀器內(nèi)部空氣潔凈、防止光學(xué)元件污染）、清潔光學(xué)部件（需專業(yè)人員或按嚴(yán)格指南操作）、以及執(zhí)行全面的儀器校準(zhǔn)（如季度性或年度性光電倍增管PMT增益校準(zhǔn)）。詳細(xì)記錄維護(hù)時(shí)間和內(nèi)容。
- 耗材流轉(zhuǎn)需管理： 建立實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的耗材（特別是易損件如HEPA濾網(wǎng)）庫存管理，確保備件充足，及時(shí)更換， 避免因耗材短缺影響儀器使用。
?? 五、 安全防護(hù)：貫穿始終的原則
- 個(gè)人防護(hù)到位： 操作儀器及處理樣本/試劑時(shí)，始終佩戴符合要求的個(gè)人防護(hù)裝備（PPE），如實(shí)驗(yàn)服、手套（推薦雙層，尤其是處理潛在傳染性樣本時(shí)）、護(hù)目鏡或面罩。
- 生物安全意識(shí)強(qiáng)化： 深刻認(rèn)識(shí)到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物是高濃度的潛在污染源。所有接觸過擴(kuò)增產(chǎn)物的耗材（如槍頭、廢液缸、PCR板/管等）必須作為生物危險(xiǎn)廢棄物處理。在操作區(qū)域丟棄前，務(wù)必進(jìn)行徹底的去污染處理（如高壓滅菌或使用有效消毒劑浸泡）。牢記 “預(yù)防勝于補(bǔ)救” 的污染控制鐵律。
- 遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)程： 嚴(yán)格遵循所在實(shí)驗(yàn)室制定的各項(xiàng)安全規(guī)章制度、廢棄物處理流程和應(yīng)急預(yù)案。