校準準備

1. 工具與設備：準備高精度的標準溫度計，其精度應至少比 ABI 熒光定量儀溫度傳感器的精度高一個量級，例如標準溫度計精度為 ±0.1℃，以確保校準的準確性。同時，準備好用于拆卸和安裝溫度傳感器的合適工具，如螺絲刀、鑷子等，以及用于連接溫度傳感器與測量設備的線纜和轉接器。
2. 環境條件：選擇一個溫度穩定、無明顯氣流干擾的環境進行校準。理想的環境溫度應接近儀器的正常工作溫度范圍中點，例如若儀器工作溫度范圍為 20℃ – 80℃，則選擇約 50℃的環境較為適宜。在校準過程中，保持環境溫度波動不超過 ±0.2℃。
3. 儀器設置：開啟 ABI 熒光定量儀，進入儀器的服務模式或校準模式（具體操作方法參考儀器的用戶手冊）。在該模式下，確保能夠讀取和記錄溫度傳感器的原始數據，以及設置儀器的校準參數。

校準操作流程

1. 初始數據記錄：在當前環境溫度下，使用標準溫度計測量環境實際溫度，并記錄該數值。同時，在儀器的校準模式中，讀取并記錄溫度傳感器此時輸出的原始數據，如電阻值或電壓值。
2. 多點校準：為提高校準精度，通常選擇多個溫度點進行校準。例如，在儀器的工作溫度范圍內，選取 25℃、50℃、75℃三個溫度點。通過外部加熱或制冷設備，將儀器內部溫度緩慢調整至第一個校準溫度點，如 25℃。等待溫度穩定，一般穩定時間不少于 15 分鐘，期間密切觀察標準溫度計的讀數，確保溫度在目標值 ±0.2℃范圍內波動。待溫度穩定后，再次讀取并記錄標準溫度計的溫度值以及溫度傳感器的原始數據。按照相同的方法，依次對其他校準溫度點進行操作。
3. 校準曲線繪制：根據記錄的標準溫度計溫度值和對應的溫度傳感器原始數據，利用專業的數據處理軟件或繪圖工具繪制校準曲線。以溫度為橫坐標，溫度傳感器原始數據為縱坐標，通過線性回歸等方法擬合出一條最佳曲線。例如，若溫度傳感器輸出為電阻值，在校準曲線上可得到不同溫度下對應的電阻值關系。
4. 校準參數設置：將繪制好的校準曲線參數輸入到 ABI 熒光定量儀的校準設置中。儀器通常提供相應的界面，用于輸入校準曲線的斜率、截距等參數。輸入完成后，保存校準設置，并退出校準模式。

校準結果驗證

1. 單點驗證：選擇一個未在校準過程中使用過的溫度點，如 40℃，通過外部設備將儀器內部溫度調整至該溫度點。等待溫度穩定后，讀取標準溫度計的溫度值和儀器顯示的溫度值。對比兩者，誤差應在儀器規定的允許范圍內，如 ±0.5℃。若誤差超出范圍，需重新檢查校準曲線的繪制和參數輸入是否正確，必要時重新進行校準操作。
2. 全程驗證：按照儀器的正常工作流程，運行一次模擬的 PCR 實驗，設置實驗過程中的溫度變化涵蓋儀器的工作溫度范圍。在實驗過程中，使用標準溫度計實時監測儀器內部溫度，并與儀器顯示的溫度值進行對比。觀察整個溫度變化過程中，儀器顯示溫度與標準溫度計測量溫度的偏差情況，確保溫度偏差在允許范圍內，且溫度變化曲線與預期相符。若驗證過程中發現問題，需進一步排查校準過程中可能出現的錯誤，或檢查儀器的硬件和軟件是否存在其他故障。